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通过改变DNA检测条件获得理想结果应用

作者:毕思特科技 来源:毕思特科技 浏览数:62 发布时间:2018-9-27 9:27:38

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通过改变DNA检测条件获得理想结果应用

    通常本实验室在310遗传分析仪上进行检测时,取1.5ul扩增产物加入含有24.4 ul上样液(24 ul甲酰胺中加入0.4 ulGenescan 500ROX作为分子量内标)的0.5ml试管,进样时间设定为5s进行检测,均能取得良好效果,但对于DNA模板过少或过多的扩增产物可通过改变检测的扩增产物量和进样时间来获得理想结果。

一、案例

    案例1:两幼女范某、朱某在公共厕所被一男子强奸,经排查孙某有重大嫌疑,且案发后突然离宁,侦察人员连夜驱车至外地采取孙某血样,并让受害人辨认,受害人指认是孙某所为,但孙某否认犯罪事实,将受害人带至本实验室检查,范某的外阴拭子涂片检见极少量精子,将拭子用两步法消化后硅珠法提取DNA,扩增后检测,部分位点峰值过低无法分型,将检测的扩增产物量改为3 ul,进样时间设定为15s,于310遗传分析仪上检测,结果图峰理想,分型准确,与孙某的血样进行比对,基因型不一致,从而排除了孙某,保护了无辜。

    案例2:一女青年骑车下班途中被一男子拦路抢劫强奸,经工作,钱某嫌疑重大,但钱某拒不交待,侦察陷入僵局,遂将钱某的血样及受害人的长裤一并送至本实验室,经检验,受害人的长裤上检见精斑,提取精子DNA后扩增、检测,由于DNA模板过多,出现许多杂峰,无法正确分型,将检测的扩增产物量改为0.5 ul,进样时间设定为2s,重新检测后发现图峰理想,分型准确,与钱某的血的基因型一致,最终钱某在科学面前不得不交待其全部罪行。

二、讨论

    许多基层公安机关DNA实验室没有条件进行DNA定量,无法确定模板DNA浓度,扩增加样时的模板量只能凭经验估计,有的实验人员在没有把握的情况下分梯度进行扩增,这样比较浪费试剂。本实验室在检测时发现结果不理想时,通过改变检测时的扩增产物量及进样时间来获得理想图峰,一般来说,DNA量过多可减少加入的扩增产物量和进样时间,DNA量过少则可增加加入的扩增产物量和进样时间,这样既节省了时间,节约了检材,也节省了试剂,不失为一种行之有效的补救方法。

 

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